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磨刀
要想切好一張切片,首先要有一把鋒利的切片刀。磨刀是從事切片技術(shù)人員的一項(xiàng)*基本技術(shù),刀磨的好壞,直接關(guān)系到切片的質(zhì)量。磨刀的手法各人不同,但都要求用力均勻,使刀口和磨刀石*接觸,兩手的用力點(diǎn)應(yīng)在刀口上,而不是在刀背上。切片刀應(yīng)用一次磨一次,每次僅需10~15分鐘,玻片,過長時(shí)間的磨刀,容易把已經(jīng)磨出的鋒刃磨掉,檢查切片刀是否鋒利,用手試摸刀口的方法并不十分科學(xué),不僅不能證明切片刀是否*鋒利,而且容易損害刀口,**的辦法是每次磨好后拿一個(gè)蠟塊試切一下。每次磨好刀后,應(yīng)將磨刀石用蓋子蓋好,以防灰塵掉在磨刀石上,用有灰的磨刀石磨刀,會(huì)使切片刀產(chǎn)生許多細(xì)小的缺口?,F(xiàn)在很多單位都買了磨刀機(jī),磨刀機(jī)用來開刀鋒和磨缺口的確不錯(cuò),辣椒果實(shí)表皮細(xì)胞裝片(示單紋孔,但由于磨刀的角度和時(shí)間不易掌握,故效果并不理想。根據(jù)我們的經(jīng)驗(yàn),*的鋒刃很難用機(jī)器磨出來。一次性刀片在很大程度上解決了這個(gè)問題。如用一次性刀片,必須及時(shí)更換刀口。一個(gè)刀口切小標(biāo)本不應(yīng)超過20~25 只蠟塊,切大標(biāo)本不應(yīng)超過10~15只蠟塊。
染色切片可用不同方法,使其干燥,然后進(jìn)行染色。因?yàn)槊恳粡堓d片上粘貼的是蠟帶,因此必須先用*去除石蠟再用酒精去除*,再進(jìn)入水中,才能染色,染色的方法很多,要根據(jù)每張標(biāo)本要求顯示的目的選擇不同的染劑,**的是蘇*,伊紅染色蘇*使細(xì)胞核是深紫色,伊紅使細(xì)胞質(zhì)顯粉紅色,以此顯示清晰的細(xì)胞形態(tài)和核的大小,位置,洋蔥表皮裝片植物玻片,染色后再根據(jù)制片的基本原理,使帶水的載片經(jīng)歷脫水→透明步驟*后喲感樹膠封片
基本步驟如下:*×2(脫蠟)→酒精 *(1:1)→酒精×2→90% 酒精→80%→70%→50%→30%→水→蘇*染色(鏡檢)→水→50%→70%→90%→0.5%伊紅(95%酒精配制)→95%→*:酒精(1:1)→*×2→樹膠封片 簡便方法:
先將各種材料切成片,要薄,不要用力的用鑷子夾,放在載玻片上,在載玻片上滴一滴水,將薄片放入,如顏色十分淡,加碘酒染色,蓋上蓋玻片,用紙巾將水吸干,胞間連絲切片(柿胚乳)植物玻片,即可。
生物切片進(jìn)行染色的過程
生物切片切取的無色組織切片浸入不同染液中,使不同的組織或細(xì)胞顯示不同的顏色,加強(qiáng)各種結(jié)構(gòu)之間的對比性,以便顯微鏡觀察分辨的過程稱為染色。he染色是應(yīng)用*多的常規(guī)染色法,又稱為普通染色法。該染色法可將組織、細(xì)胞的各種成分染色,而且適用于任何固定液和各種切片法制作的組織切片,已染色的標(biāo)本可長期保存,不易褪色。
生物切片的染色過程是一項(xiàng)繁復(fù)的技術(shù)操作,包括三大過程二十余步程序。
①脫蠟:將烘干的石蠟切片通過*脫蠟,再通過濃度遞減的乙醇溶液,將組織還原至含水狀態(tài)。
②染色:包括浸染、分化和水洗等步驟。
③脫水、透明:將已染色的含水組織,以濃度遞增的乙醇溶液脫水和*透明。這是第二次透明,切片透明的目的就是使光線透過,以便于在顯微鏡下觀察。
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